CT-1PLUS電位滴定儀恒PH滴定測定青霉素酰化酶活性

關(guān)鍵詞：青霉素酰化酶

行業(yè)：醫(yī)藥/高校

CT-1PLUS恒PH滴定測定青霉素酰化酶活性

摘要

青霉素酰化酶，又稱為青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶。主要從大腸埃希菌胞內(nèi)酶和巨大芽孢桿菌胞外酶獲得，該酶已大規(guī)模應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)β-內(nèi)酰胺類抗生素的關(guān)鍵中間體和半合成β-內(nèi)酰胺類抗生素。本試驗(yàn)通過CT-1Plus恒pH滴定來進(jìn)行青霉素酰化酶活性測試。

儀器配置

●CT-1Plus電位滴定儀

●pH-102

●20mL高精度計量管

●100mL滴定杯

試劑配置

●滴定劑：*標(biāo)準(zhǔn)溶液

●滴定度：0.1001mol/L 

●溶劑：磷酸鹽緩沖溶液

●其它試劑：青霉素鉀鹽

測定方法

●酸堿中和/恒pH滴定

●控制反應(yīng)體系pH值在8.0，在磷酸緩沖體系中加入一定量的青霉素酰化酶和青霉素鉀鹽，插入電極和滴定頭，選用恒pH滴定方法，用標(biāo)準(zhǔn)*標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定。

儀器參數(shù)     

● 最小滴定體積：10μL  

● 最大滴定體積：10μL

● 攪拌速度：200       

● 每滴間隔：800ms

● 終點(diǎn)模式：恒pH   

● 終點(diǎn)設(shè)置：8.0

測試數(shù)據(jù)

● 環(huán)境溫度：20℃ 

● 環(huán)境濕度：50% 

● 測試時間：5min

測試結(jié)果：該青霉素酰化酶在本次實(shí)驗(yàn)條件下的酶活力為72.8 I.U。

• 上海禾工電位模塊全自動電位滴定儀CT-1PLUS

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