北京迪科馬科技有限公司（迪馬科技）
食品檢測(cè)人員必看！二甲基黃和二乙基黃檢測(cè)新方案
檢測(cè)樣品：火腿 豆腐絲 雞精 白胡椒
檢測(cè)項(xiàng)目：二甲基黃 二乙基黃
方案概述：依據(jù)BJS 202505食品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法，本研究采用乙腈提取結(jié)合分散固相萃取凈化ProElut® PMR QuEChERS(Cat.#:64767)，選用色譜柱Endeavorsil® C18 150mm x 3.0mm，1.8μm(Cat.#:87008)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)組分高效分離，建立LC-MS/MS同時(shí)測(cè)定二甲基黃與二乙基黃的方法，優(yōu)化前處理與質(zhì)譜參數(shù)
調(diào)味品、豆制品、肉制品等食品中
二甲基黃、二乙基黃的測(cè)定
參考BJS 202505 《調(diào)味品、豆制品、肉制品等食品中紅2G、二甲基黃、二乙基黃的測(cè)定》
二甲基黃與二乙基黃屬于禁用偶氮類工業(yè)染料，被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)列為2B類致癌物，長(zhǎng)期攝入可損傷肝腎、存在健康風(fēng)險(xiǎn)，我國(guó)已明確禁止用于食品加工。部分不法商販?zhǔn)芾骝?qū)使，違規(guī)將其添加于肉制品、豆制品、香辛料中，用以改善色澤、掩蓋原料缺陷，嚴(yán)重威脅食品安全。
傳統(tǒng)檢測(cè)方法以高效液相色譜法為主，在復(fù)雜基質(zhì)中易受干擾，定性準(zhǔn)確性與靈敏度難以滿足痕量篩查需求。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)憑借高分離能力、高特異性與高靈敏度，可實(shí)現(xiàn)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)精準(zhǔn)定性定量，成為非法染料檢測(cè)的核心技術(shù)。
依據(jù)BJS 202505食品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法，本研究采用乙腈提取結(jié)合分散固相萃取凈化ProElut® PMR QuEChERS(Cat.#:64767)，選用色譜柱Endeavorsil® C18 150mm x 3.0mm，1.8μm(Cat.#:87008)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)組分高效分離，建立LC-MS/MS同時(shí)測(cè)定二甲基黃與二乙基黃的方法，優(yōu)化前處理與質(zhì)譜參數(shù)，彌補(bǔ)常規(guī)方法在復(fù)雜食品基質(zhì)中檢測(cè)短板，為食品安全監(jiān)管、風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警與市場(chǎng)整治提供精準(zhǔn)高效的技術(shù)支撐，筑牢食品安全檢測(cè)防線。
本方案適用于火腿、豆腐絲、雞精、白胡椒等食品中二甲基黃、二乙基黃的測(cè)定，定量限為2μg/kg。
(1) 二甲基黃、二乙基黃混標(biāo)儲(chǔ)備液：溶于乙腈，濃度為500μg/mL(Cat.#:49137)；
(2) 混標(biāo)工作液 I：量取定量?jī)?chǔ)備液，用乙腈溶解，配置成濃度為1μg/mL工作液；
(3) 混標(biāo)工作液 II：量取定量工作液I，用乙腈溶解，配置成濃度為0.1μg/mL工作液；
(4) 二甲基黃、二乙基黃基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：稱取空白基質(zhì)2g，置于50mL離心管中，精密加入適量混標(biāo)工作液，按照步驟3進(jìn)行前處理，步驟4進(jìn)行凈化。
稱取2g樣品于50mL離心管中，加入10mL乙腈，渦旋混勻1min，超聲10min，10000r/min離心10min，轉(zhuǎn)移上清液至20mL容量瓶中；殘?jiān)偌?mL乙腈，重復(fù)提取一次，上清液轉(zhuǎn)移至同一容量瓶中，用乙腈定容至刻度，混勻，待凈化。
ProElut® QuEChERS (Cat.#:64767)
向裝有QuEChERS凈化粉的離心管中加入2mL水，渦旋混勻活化后，精密吸取10mL提取液，加入到該離心管，渦旋1min，3700r/min離心5min，取上清加入到裝有1.5g無(wú)水硫酸鎂和0.5g氯化鈉的離心管中，渦旋1min，3700r/min離心5min，取上清液至氮吹管中，40℃氮吹濃縮至近干，精密加入1mL 50%乙酸銨乙腈溶液復(fù)溶，過(guò)0.22μm PTFE 濾膜(Cat.#:30104)，上機(jī)分析。
UPLC條件
色譜柱: Endeavorsil® C18，150x3.0mm，1.8μm (Cat.#87008)
流速：0.3mL/min
進(jìn)樣量：2μL
柱溫：40℃
流動(dòng)相：A: 10mmol/L乙酸銨水溶液(含0.1%甲酸) B: 乙腈
質(zhì)譜條件
電離模式: ESI
掃描方式: 正離子掃描
檢測(cè)方式: 多反應(yīng)監(jiān)測(cè)
電噴霧電壓: 5500V
霧化氣壓力: 50psi
輔助氣壓力: 50psi
氣簾氣壓力: 20psi
離子源溫度: 500℃
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